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NanoLuc®萤光素酶
NanoLuc® Luciferase
NanoLuc®萤光素酶的小尺寸和明亮的发光特性为许多应用带来了极高的检测灵敏度。从NanoBRET®技术，一种基于BRET的方法来研究蛋白质：蛋白质和蛋白质：小分子相互作用，到NanoLuc®二亚单元技术(NanoBiT)，NanoLuc®是在生理相关水平上研究细胞中遗传反应和蛋白质动态的基石。
NanoBiT® 技术
NanoBiT® Technology
| NanoLuc® Binary Technology（NanoBiT）是一种基于NanoLuc® 萤光素酶的结构互补型报告基因系统。它由一个优化的LgBiT亚基（18kDa）和一个与LgBiT具有不同亲和力的小型互补肽亚基（11个氨基酸）组成。低亲和力的互补肽被称为SmBiT。在研究细胞内蛋白质相互作用时，LgBiT和SmBiT亚基作为目标蛋白的融合体在细胞中表达。当两个蛋白相互作用时，亚基结合形成一个活性的NanoBiT® 酶，并在Nano-Glo® 底物存在的情况下产生明亮的发光信号。这种技术使得在活细胞中以高灵敏度和特异性实时研究蛋白质相互作用成为可能。 |
观看视频，了解更多关于NanoBiT®技术研究蛋白质：蛋白质相互作用。 |
Lumit® 免疫检测技术
低亲和力的LgBiT和SmBiT亚基已被进一步改进用于免疫检测，从而产生了Lumit® Immunoassay。在这种NanoBiT技术的配置中，抗体分别用LgBiT和SmBiT亚基进行化学标记。当这些标记的抗体与目标分析物结合时，SmBiT和LgBiT彼此靠近，形成有活性的NanoBiT® 萤光素酶，并在Lumit® 检测试剂的存在下产生发光信号。
Lumit® Immunoassays检测原理图
Lumit® Immunoassay为传统的ELISA检测提供了一种简单的替代方案，其无需洗涤步骤，并且已经开发出针对多种热门靶标（包括细胞因子和胰高血糖素）的直接、间接和竞争性结合检测形式，以及DIY解决方案。
HiBiT蛋白标签技术
| LgBiT亚基也可以与一个高亲和力的小亚基HiBiT互补，从而创建HiBiT蛋白质标签系统。在这种技术配置中，LgBiT和HiBiT会自发地相互作用，重新构建出明亮的NanoBiT® 酶。HiBiT被用作一种蛋白质定量标签，可以通过传统的克隆方法引入，或者通过CRISPR-Cas9基因编辑在内源性位点引入。带有HiBiT标签的融合蛋白可以使用含有LgBiT的检测试剂检测，可以在共表达LgBiT亚基的活细胞中被检测，或者直接使用一种高灵敏度的抗HiBiT单克隆抗体进行检测。HiBiT蛋白质标签系统是一种简单灵活的蛋白质检测方法，具有高灵敏度，能够准确检测到内源性表达水平下的低丰度蛋白质。 |
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