利用 ADP-Glo™ Assay 进行激酶选择性分析
ADP-Glo™ Kinase Assay是一种适用于所有激酶研究的通用体外生化测定法。该检测可测定激酶反应中生成的ADP。ADP可转化为ATP,可用于生成稳定的发光信号。
ADP-Glo™ Assay的适用范围包括:
- 高通量筛选
- 作用方式研究
- 激酶抑制剂分析
经过优化的Kinase Enzyme System可与ADP-Glo™ Assay共同使用,便于筛选和分析激酶抑制剂。与DNA损伤应答相关的激酶如下:
· DNA-PK | · CDK6/Cyclin D3 |
· CHK1 | · PLK-家族 |
· CHK2 | · CK2α亚型 |
· CDK2/Cyclin A1 | · MAPKAPK2(MK2) |
· CDK2/Cyclin E1 | · MARK3 |
活细胞靶标占据
NanoBRET™ Target Engagement(TE) Kinase Assays可用于定量检测活细胞内化合物与全长激酶的结合。该检测可对340多种激酶,包括许多参与DDR的激酶(例如,CHK1、CHK2、CDK2/ Cyclin A1、CDK2/Cyclin E1、CDK6/ Cyclin D、PKMYT1、PLK家族、CK2α亚型、MAPKAPK2(MK2)、MARK3、Wee1)。每个激酶都有单独的使用说明。查看Kinase Target Engagement Assay Selection Guide,了解可用激酶的完整列表。
无细胞与活细胞内分析方法相比,DDR激酶抑制剂选择性
检测总的或磷酸化的细胞靶标
使用Lumit™ Immunoassay Cellular Systems研究DNA损伤应答中的信号节点。
Lumit™ ImmunoassayCellular System是一种无需洗涤的生物发光免疫分析,可直接测量细胞裂解物中的目标分析物。该分析可以定制,以检测参与DNA损伤应答的信号节点,使用简单的工作流程,不需要培养液移除或裂解物转移。只需将标记抗体添加至样本中,添加检测试剂,读取发光信号——所有步骤都在同一块检测板中完成!
查看海报以获得更多数据:使用 Lumit 免疫检测试剂盒检测 DNA损伤应答通路标志物激活
DNA损伤应答通路标记物。Lumit® Immunoassays 显示了细胞 CHK1 和 H2AX 磷酸化的激活和抑制作用。图A和C. 使用 Lumit® Immunoassay Cellular System 检测 A549 细胞中依托泊苷诱导的 H2AX 磷酸化。该磷酸化可被ATM激酶抑制剂抑制,但不能被ATR抑制剂抑制。下载 H2AX 应用说明了解详细信息。图B和D. 使用Lumit® Immunoassay Cellular System 检测 SW620 细胞中羟基脲诱导的 CHK1 磷酸化。抑制 ATR 可减少 CHK1 磷酸化,抑制 ATM 则不会。下载 CHK1 应用说明了解详细信息。