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3D模型检测
3D Assays
Promega 可以提供细胞活力、毒性、凋亡、代谢、基因表达等经过验证的专用于 3D 培养物的检测方法。灵敏度高，操作简单，可实现高通量检测，并且兼容多种如类器官的 3D 培养系统。
细胞健康检测
Cell Health Assay
目前市场上大部分商品化的细胞检测方案，都是针对单层的贴壁培养细胞或者散在的悬浮培养细胞开发的，并不能直接用在3D模型上。3D细胞团中内层细胞与外层细胞相比获得营养和氧气的机会更少，形成自然梯度。目前Promega能够提供的，已经测试过，并且有验证过操作方案的细胞健康检测方法如下：
细胞活力检测
CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay 【明星产品】，裂解性检测，终点法 CellTiter-Glo® 3D 与 ATPlite 1Step 试剂相比的裂解能力 CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay 是基于 ATP 检测的快速细胞活力检测法。在国内外被 广泛应用和公认的高灵敏度发光检测法，细胞活力检测的金标准。而 CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay 基于经典 CellTiter-Glo® 检测原理，萤光素酶反应依赖活细胞中的 ATP，产生的光正比于活 细胞的数量，专门为检测 3D 微组织球的细胞活力而优化。 RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay 非裂解性检测，72小时实时检测 实时监测与终点法裂解法检测结果相一致 非裂解性、均质、非 ATP 依赖的生物发光法细胞活力检测系统，可检测细胞还原电位继而反应出细胞的代谢情况，实时监测 培养基中的活细胞数量。试剂最长可在 72 小时内保持性能稳定，对活细胞无毒性，无需洗涤细胞，也无需去除培养基或加 入其它试剂，即可完成活细胞数量检测。试剂本身的非裂解的特性使其可在同一细胞培养孔中持续监测细胞，从而减少细胞 用量和细胞培养的成本，细胞也可用于下游应用，包括多重检测和核酸分析。
细胞毒性检测
| | CellTox™ Green Cytotoxicity Assay DNA 结合荧光染料，72小时实时检测 | | 与 CellTiter-Glo® 3D 细胞活力检测叠加使用 | |
| | CellTox™ Green Dye 是专利荧光染料 , 对细胞无毒性作用 , 当细胞膜完整性受损时 , 可与双链 DNA 结合 , 荧光信号大幅提 升 , 处理细胞 72 小时后，荧光信号仍保持稳定，可监测长达 72h 的药物处理期间的细胞毒性作用，或终点法检测长时间处 理后的细胞毒性作用。 | |  | |
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| | 微量多次取样实时检测 | | 从一个样本孔中检测微球体时间依赖的细胞毒性 | |
| | LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay 是一种通过对细胞膜破损释放到培养基中的乳酸脱氢酶（LDH）进行定量的生物发光、多孔板检测方法。与比色和荧光法相比，生物发光法更加灵敏， 可以对从少量细胞，包括原代细胞和 3D 细胞，释放的 LDH 进行精确检测。该方法仅需从每个处理孔中移取少量细胞培养基（2-5μL），使得实验者可以在同一个孔进行多时间点取样，得到更多数据，并利用剩余培养基和细胞进行其他细胞学实验。 | |  | |
细胞凋亡检测
| | 裂解性，高灵敏度 | | Matrigel® 包埋培养体系 Caspase 3/7 的活性检测 | |
| | 此试剂盒为检测 Caspase-3/7 活性的均质发光检测方法。试剂盒可检测 3D 培养细胞中的 Caspas-3 和 Caspase-7 的活性，用于凋亡研究，也可与其他细胞学检测联用进行多重检测或抑制剂筛选。Caspase-Glo® 3/7 3D Assay 为最新推出的专为3D 检测而优化的系统，但是经典版 Caspase-Glo® 3/7 Assay 也同样可以用于 3D 系统。 | |  | |
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| | RealTime-Glo™ Annexin V Apoptosis and Necrosis Assay 48h 实时监测，荧光 + 发光检测 | | 球状体 3D 培养模型凋亡和继发性坏死的检测 | |
| | RealTime-Glo™ Apoptosis and Necrosis Assay 是一种简单，非裂解性的实时监测凋亡进程的方法。无需处理多重多孔板，复杂的处理过程和特殊的检测仪器。只需具有发光和荧光检测功能的多功能读板仪即可。该方法可对 3D 培养模型进行长达48 小时的监测。 | | | |
自噬检测
| | Autophagy LC3 HiBiT Reporter Assay 裂解性，终点法 | | 检测 HEK293 细胞球对自噬刺激剂和抑制剂的反应 | |
| | Autophagy LC3 HiBiT Reporter Vector 包含与人 LC3 蛋白融合的 HiBiT 标签。在诱导自噬时，部分 LC3 报告蛋白被自噬体捕 获并降解。在加入含有 LgBiT 蛋白和底物的 Nano-Glo® HiBiT Lytic Reagent 后，LgBiT 与 HiBiT 标签发生相互作用，重新组成 明亮发光的 NanoLuc® 酶。在多达 7 个数量级的范围内，发光信号与 HiBiT 标记的 LC3 报告蛋白成正比。该系统可定量且结果明确的 LC3 报告基因检测，简单的加样 - 混合 - 检测操作模式，同时可拓展到高通量应用。提供报告基因稳转细胞系，也提供载体 + 检测试剂。 | |  | |
细胞色素 P450 （CYP）检测
| | 裂解 / 非裂解性检测 | | 药物作用下人肝微组织中 CYP3A4 酶活性检测 | |
| | 该检测系统使用的 P450 发光前体底物是甲虫萤光素（beetle luciferin）的衍生物，甲虫萤光素是萤光素酶的底物。此衍生物本身不是萤光素酶的底物，但是当 P450 酶将其转化为萤光素时，即成为萤光素酶底物，并与萤光素酶反应而产生光，光强度与 P450 活性成正比。 | |  | |
