HaloTag® 技术为蛋白质标记提供了一种多功能的方法,使研究人员能够以卓越的精确度和灵活性研究蛋白质动力学。HaloTag® 技术的实际应用不仅限于传统成像,对于使用大脑微球体等高级细胞培养模型的实验方法也极为宝贵。在这些模型中成功整合 HaloTag®-NanoLuc® 融合蛋白展示了该技术的稳健性和适应性。通过结合荧光成像和发光测量,分子和细胞生物学研究继续在理解复杂细胞生物学方面取得进展。Janelia Fluor® HaloTag® 配体不仅提高了蛋白质标记的准确性和灵活性,还为诊断应用和微球体的实时纵向测量开辟了新的途径。通过不断突破蛋白质研究的可能性,HaloTag® 技术站在科学发现的前沿,为监测蛋白质提供了无限的可能性。
应用:Janelia Fluor® HaloTag® 配体监测大脑微球体中的实时神经突生成
| 图. 从 2D 培养的解离的类器官收集的 HaloTag®-NanoLuc® 融合蛋白的发光输出,使 CMV 启动子(蓝色)和 SYN1 启动子(红色)驱动下表达的 HaloTag® 蛋白得以特异性定量。 |
图 . 用 Janelia Fluor® HaloTag® 配体标记的大脑微球体。上:大脑微球体培养的低倍放大图像。下:应用了 HaloTag®-NanoLuc® 融合蛋白的大脑微球体,该融合蛋白在 synapsin 1 (SYN1) 基因启动子驱动下表达 HaloTag® 蛋白,用 Janelia Fluor® 646 HaloTag® 配体(红色)标记。细胞核用 Hoechst 染色。该图像是在尼康 AX 共聚焦显微镜的 10X 物镜下获得的。
图 . Janelia Fluor® HaloTag® 配体在单次添加后可在大脑微球体中保持两个月的荧光。A) 表达由 SYN1 启动子驱动HaloTag®-NanoLuc® 的大脑微球体。HaloTag® 蛋白用 Janelia Fluor® 646 HaloTag® 配体标记,细胞核用 NucBlue™ Live ReadyProbes™ 试剂(Hoechst 33342)标记。成像使用尼康 AX 共聚焦显微镜的 20 倍物镜进行。B) 在 A 中成像的相同大脑微球体在 45 天时再次成像。