细胞代谢检测
Cell Metabolism Assay
近年来,Promega在逐渐丰富生物发光细胞代谢检测平台。目前验证过,可以用在3D模型检测的,包括经典的P450酶检测系统,用于氧化应激检测的GSH(谷胱甘肽)、ROS(活性氧簇)检测系统,还有新推出的多个代谢物检测系统,包括糖代谢、氨基酸代谢和脂代谢等多种细胞代谢物的检测。这些方法大多都可以直接检测释放到上清中的标记物,或者是可以通过优化裂解方法来适应3D系统的检测需求。
代谢物检测
| Promega 提供基于多孔板的生物发光法细胞代谢物检测方法,可用于糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢等检测,助力监测肿瘤和免疫细胞代谢的变化以及代谢性疾病的基础研究及药物发现。具有以下优势:
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二核苷酸检测
| NAD/NADH-Glo™ and NADP/NADPH-Glo™ Assays 裂解性,终点法检测 | | NAD/NADH 的信号与增大的 3D 微组织直径呈相关性 | |
| NAD/NADH-Glo™ Assay 和 NADP/NADPH –Glo™ Assay 都是均质生物发光法检测试剂盒,前者能够检测总的氧化型和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD+ 和 NADH),并确定 NAD+ 和 NADH 在生物样品或特定酶学反应中的比值。后者能够检测总的氧化型和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (NADP+ 和 NADPH),并确定 NADP+ 和 NADPH 在生物样品或特定酶学反应中的比值。 3D 培养模型检测步骤:增加洗涤剂的量,在裂解步骤中延长在裂解缓冲液中的孵育时间。 | | | |
ROS 水平检测
| 裂解 / 非裂解性检测 | | 化合物处理后细胞球 H2O2 水平检测 | |
| ROS-Glo™ H2O2 Assay 是一种均质、快速、灵敏的生物发光检测试剂盒,萤光素衍生物底物与样品共孵育,可直接与 H2O2 反应生成萤光素前体。加入 ROS-Glo™ Detection Solution 后,萤光素前体转换为萤光素,经溶液中的 Ultra-Glo™ 重组萤光素酶催化产生发光信号,光信号强度与样品中的 H2O2 水平成正比。
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谷胱甘肽水平检测
| 裂解性,终点法检测 | | 化合物处理后细胞球谷胱甘肽水平检测 | |
| GSH 水平的改变对细胞毒性反应的评价非常重要,并且是氧化应激的重要指标,可能引起细胞凋亡或细胞死亡。Promega 试剂盒提供了简单、迅速的微孔板检测方案,直接检测微孔板培养细胞中总谷胱甘肽(GSH+GSSG)及氧化型谷胱甘肽(GSSG ) 水平、 GSH 或 GSH/GSSG 比值,检测获得的结果既可反应细胞健康或氧化应激水平,也可用于药物开发筛选,发现能够影响细胞内谷胱甘肽水平的新化合物。 | | | |
胞外 ATP(eATP)检测
| RealTime-Glo™ Extracellular ATP Assay 非裂解性检测,实时检测 | | 在 3D 细胞培养模型中检测免疫原性细胞死亡 | |
| eATP 作为免疫原性细胞死亡(ICD)的生物标志物,传统方法需要吸取不含细胞的培养基上清检测。 RealTime-Glo™ Extracellular ATP Assay 提供一种胞外 ATP 检测底物,使用您偏好的细胞培养液溶解检测底物,得到非裂解性的均质检测试剂。试剂在给药或处理的时候直接加入培养的细胞中。释放的 ATP 与试剂中的 Ultra-Glo™ 萤光素酶反应产生光信号, 以评估在长达 24 小时的刺激暴露过程中持续的 ATP 释放情况, | | | |