NanoBRET™ TE CDK家族/192种激酶选择性分析系统新品发布
Promega作为激酶靶点药物研发技术的资深供应商，提供从激酶系统，检测试剂和检测仪器的，高灵敏度、高通量的完整解决方案，被全球顶尖各大制药企业广泛认可和稳定使用。灵活的多样的试剂选择，为您的研究提供更多的可能性。
细胞学检测：NanoBRET™ Target Engagement (TE) 非裂解性、活细胞、实时定量的激酶与靶点药物结合检测系统，使用全长激酶，拥有超过350种激酶载体可供选择，并且激酶载体种类还在不断增加。
生化检测：ADP-Glo™ Kinase Assay体外激酶活性检测系统，配套近400种人类激酶系统，包含100多个突变型。
多功能检测仪：高效，易用的如GloMax® Discover多功能检测仪，用于化学发光，荧光，吸收光，BRET 和 FRET检测。
基于优势的NanoBRET™ TE技术，Promega发布更高效的激酶选择性分析系统新品——NanoBRET™ TE K192 Kinase and CDK Selectivity Systems ，“一键式” 检测周期蛋白依赖性激酶（CDK）家族或检测192种代表广泛激酶的药物选择性分析系统。具有以下几大优势：
-
活细胞高灵敏度检测
-
一键式选择性分析流程
-
灵活的多孔板检测模式
-
出色的数据质量
NanoBRET™是大幅改良的生物发光共振能量转移（BRET）分析平台，使用小而明亮的专利型NanoLuc® 萤光素酶作为能量供体和细胞可渗透的NanoBRET™ TE tracer 作为能量受体。添加待测化合物后，化合物与 tracer 竞争靶蛋白的结合而导致BRET信号减弱。
NanoBRET™ TE K192 Kinase Selectivity System 用于广泛激酶选择性分析检测，可以在单次实验中定量检测化合物对192种激酶的占有率。该系统包含：
● NanoBRET™ TE K192 Kinase Vector Panel （192 种激酶载体组试板，Panel A和B两个96孔板）
● NanoBRET™ TE Intracellular Kinase Assay (K-10)（激酶检测系统）
192 个激酶在树状图中表示为绿点，表明该系统广泛覆盖激酶组
NanoBRET™ Target Engagement (TE) CDK Selectivity Systems 可以在单次实验中检测多达16个CDK家族激酶细胞内化合物的占有率。该系统包含：
● NanoBRET™ TE CDK Kinase Vector Panel A (8种已经过高度研究的CDK激酶载体组试板) 或Panel B (8种未充分研究的CDK激酶载体组试板)
● NanoBRET™ TE Intracellular Kinase Assay (K-10)（激酶检测系统）
每种载体已经与细胞周期蛋白表达载体或载体DNA预先混合，以实现最佳的转染效果，只需解冻稀释这些载体混合物，将载体组转染到多孔板的HEK293 细胞中。孵育过夜后，将待测化合物添加到检测板中，并进行NanoBRET™ TE Assay K-10，使用NanoBRET™ Tracer ，通过多功能检测仪检测BRET 信号。
图 利用梯度稀释法对载体组A 和 B 中的 16 个 CDK 与一组抑制剂进行了测试。CDK4/6 抑制剂 Palbociclib（图A 和上表） 和 Ribociclib（表） ，显示出对 CDK4/6 非常高的选择性。而 Abemaciclib（图B 和上表） 最然对 CDK4/6 具有选择性，但它也对CDK9 和 TAIRE 家族具有选择性。其他抑制剂能有效参与CDK4/6，但也表现出附带参与其他 CDK 家族，包括 TAIRE 家族。表中没有展示>1μM 的亲和力，尽管它们是被检测的（如图A）
K192检测与生化法对比
图 用于检测激酶抑制剂结合或活性的生化检测方法可能无法准确预测细胞内激酶的结合。树状图比较了使用活细胞NanoBRET™ TE K192 Kinase Selectivity System 与生化方法检测1μM 克唑替尼时获得的靶点占有率。结果显示，细胞中的活性图谱得到了改善，使用 NanoBRET™ TE 方法，克唑替尼仅有 16 个靶点的占有率达到或超过 50%，而使用生化方法，则有 49 个激酶靶点被克唑替尼占据。使用 K192 Kinase Selectivity System 检测到的 16 种占有率大于50% 的激酶以及三次独立实验得出的平均占有率以表格形式列出。这些检测结果的标准偏差表明 K192 Kinase Selectivity System 具有可重复性。
点击图片详细了解NanoBRET™ TE技术用于激酶以及其他靶点药物相互作用研究
点击图片详细了解NanoBRET™ TE K192 Kinase and CDK Selectivity Systems 详细介绍
点击图片详细了解NanoBRET™ TE K192 Kinase Selectivity Systems 产品应用数据
点击图片详细了解NanoBRET™ TE CDK Selectivity Systems 产品应用数据
