AAV基因组滴度定量
Quantifying AAV Genome Titer
在使用qPCR或dPCR测定AAV基因组滴度前,通常使用DNA酶处理样品。DNA酶处理时的消化不一致会导致qPCR或dPCR结果数据的改变。使用TruTiter™Reagent Kit,只有完整衣壳内的DNA会被扩增。这使得AAV病毒基因组的定量一致,并且不再需要DNA酶处理。
TruTiter™ Reagent System介绍 
TruTiter™Reagent Kit使快速简单的检测实验流程成为可能

相比使用DNA酶的dPCR实验,使用TruTiter™Reagent 的变异性更低
TruTiter™ Reagent与DNA酶对比
![]() | ![]() |
腺相关病毒(AAV2-NanoLuc®构建)衣壳(1010GU/ml)在65℃下处理10分钟。热处理后,用DNA酶(红色)或TruTiter™Reagent(绿色)处理AAV构建体,使用dPCR扩增,并进行8次技术重复。 | 用0.1% Tween®-20处理腺相关病毒(AAV2-NanoLuc®构建)衣壳(1010GU/ml)10分钟。去污剂处理后,用DNA酶(红色)或TruTiter™Reagent(绿色)处理AAV构建体,使用dPCR扩增,并进行8次技术重复。 |
TruTiter™ Reagent 对比DNA酶对比哺乳动物感染性检测
将AAV2-NanoLuc®病毒颗粒(107GU/ml)在指定温度下处理10分钟。温度处理后,用DNA酶(红色)或TruTiter™Reagent(绿色)处理AAV构建体,然后进行dPCR。同时,使用HEK293细胞进行24小时感染性检测(蓝色)。为了更好地解释说明,数据以室温(R.T.)处理下的信号的百分比表示。 | ![]() |