T细胞代谢
T Cell Metabolism
代谢特征是T细胞功能的关键决定因素,对于有效的CAR-T细胞疗法具有重要价值。我们的生物发光细胞代谢检测方法可用于评估TCR修饰或CAR-T工程化T细胞对代谢需求、氧化还原环境和营养可用性的响应能力。这些基于微孔板的检测方法易于自动化,并且非常适合高通量样本分析。
易于使用且灵敏的代谢物检测
检测CAR-T细胞代谢动力学
CAR-T细胞的激活和增殖会引发多种代谢变化,这些变化有助于快速产生能量,并支持CAR-T细胞的生物合成需求。值得注意的是,CAR-T细胞表现出葡萄糖摄取和利用的增加,以及乳酸产生的增强。这些细胞还表现出关键糖酵解酶和转运蛋白表达的增加,从而实现了高效的葡萄糖代谢。
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T细胞激活和扩增过程中培养基中代谢物的动态变化如下:(A) 细胞增殖;(B) 葡萄糖消耗;(C) 谷氨酰胺消耗;(D) 乳酸分泌。
T细胞生长和扩增
在CAR-T细胞疗法的开发过程中,T细胞的扩增对于生成治疗产品起着关键作用。在这个过程中,T细胞首先从患者的血液中分离出来,并通过基因修饰使其表达嵌合抗原受体(CAR)。随后,这些经过修饰的T细胞会在培养基中与多种生长因子(如IL-2、IL-7和IL-15)共同培养,以促进它们的增殖和激活。通过这一扩增阶段会生成大量能够有效识别并靶向癌细胞的CAR-T细胞。了解扩增中CAR-T细胞群体的活性是一个关键因素。我们提供的一系列细胞活性检测方法,通过检测和定量ATP,以一种简单、加样-混合-检测的均质方法,确定培养基中活细胞的数量。
CAR-T细胞开发的示例流程

使用CellTiter-Glo® 2.0检测法测定细胞活性。通过CellTiter-Glo® 2.0检测法测定的发光强度与培养中Jurkat细胞的活细胞数量成正比,其检测范围跨越三个数量级,适用于(A)96孔板、(B)384孔板和(C)1536孔板。