T细胞治疗

T Cell Therapy

细胞治疗是一种尖端的医疗手段,它使用活细胞作为最终的药物产品,以修复或替换受损组织,或增强免疫功能,从而治疗癌症和自身免疫性疾病等多种疾病。

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T细胞代谢
T Cell Metabolism

代谢特征是T细胞功能的关键决定因素,对于有效的CAR-T细胞疗法具有重要价值。我们的生物发光细胞代谢检测方法可用于评估TCR修饰或CAR-T工程化T细胞对代谢需求、氧化还原环境和营养可用性的响应能力。这些基于微孔板的检测方法易于自动化,并且非常适合高通量样本分析。




以下是关于代谢检测组合的概述:

这些生物发光代谢检测方法用于评估用于T细胞疗法的供体T细胞的代谢和氧化应激状态。检测内容包括:
1. 代谢辅因子:ATP、NADP。  
2. 糖代谢:葡萄糖摄取、乳酸、糖原。  
3. 氨基酸代谢:谷氨酰胺/谷氨酸、支链氨基酸(BCAA)。  
4. 脂质代谢:甘油三酯/甘油、胆固醇/胆固醇酯、脂肪酸氧化。  
5. 三羧酸循环(TCA循环)标志物:苹果酸、异柠檬酸、丙酮酸。
细胞代谢检测解决方案

易于使用且灵敏的代谢物检测


NAD(P)H-Glo™检测系统的反应原理示意图。该检测是一种生物发光、均质、单一试剂添加的检测方法,能够定量监测酶促反应中还原型NADH和NADPH的浓度。氧化型NAD⁺和NADP⁺不会被检测到,也不会干扰发光信号。

检测CAR-T细胞代谢动力学

CAR-T细胞的激活和增殖会引发多种代谢变化,这些变化有助于快速产生能量,并支持CAR-T细胞的生物合成需求。值得注意的是,CAR-T细胞表现出葡萄糖摄取和利用的增加,以及乳酸产生的增强。这些细胞还表现出关键糖酵解酶和转运蛋白表达的增加,从而实现了高效的葡萄糖代谢。



T细胞激活和扩增过程中培养基中代谢物的动态变化如下:(A) 细胞增殖;(B) 葡萄糖消耗;(C) 谷氨酰胺消耗;(D) 乳酸分泌。

T细胞生长和扩增

在CAR-T细胞疗法的开发过程中,T细胞的扩增对于生成治疗产品起着关键作用。在这个过程中,T细胞首先从患者的血液中分离出来,并通过基因修饰使其表达嵌合抗原受体(CAR)。随后,这些经过修饰的T细胞会在培养基中与多种生长因子(如IL-2、IL-7和IL-15)共同培养,以促进它们的增殖和激活。通过这一扩增阶段会生成大量能够有效识别并靶向癌细胞的CAR-T细胞。了解扩增中CAR-T细胞群体的活性是一个关键因素。我们提供的一系列细胞活性检测方法,通过检测和定量ATP,以一种简单、加样-混合-检测的均质方法,确定培养基中活细胞的数量。


CAR-T细胞开发的示例流程



使用CellTiter-Glo® 2.0检测法测定细胞活性。通过CellTiter-Glo® 2.0检测法测定的发光强度与培养中Jurkat细胞的活细胞数量成正比,其检测范围跨越三个数量级,适用于(A)96孔板、(B)384孔板和(C)1536孔板。

电话:010-58256268

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