引言
无细胞蛋白表达技术是指用含有蛋白合成必需的组分(核糖体,转运RNA,氨酰合成酶,启动/延伸/终止因子,三磷酸鸟苷,ATP,Mg2+,K+)的细胞裂解物在体外进行蛋白合成。与传统的基于细菌或真核细胞的蛋白表达相比,无细胞蛋白表达系统有着独特的优势,节省时间,提高功能性/可溶性全长蛋白的产量,且仅需几小时就可以在体外表达出目的蛋白。
蛋白表达系统
Promega的无细胞蛋白表达系统分为:
真核无细胞蛋白表达系统:
| 原核无细胞蛋白表达系统:
|
真核无细胞蛋白表达系统
1. 兔网织红细胞蛋白表达系统
特别推荐产品——引用文献最为广泛的无细胞蛋白表达系统
2.麦胚蛋白表达系统
Promega产量最高的真核无细胞蛋白表达系统
TNT® SP6 High-Yield Wheat Germ Protein Expression System
3.昆虫细胞提取物蛋白表达系统
Promega活性最高的真核无细胞蛋白表达系统
TNT® T7 Insect Cell Extract Protein Expression System
原核无细胞蛋白表达系统
大肠杆菌提取物蛋白表达系统——Promega产量最高的无细胞蛋白表达系统
蛋白相互作用
机体细胞内每个蛋白质并不是独立发挥作用,通常与其它蛋白质或DNA相互作用,在特定的时间和空间内行使特定的功能,构成各项生命活动的基础。
一、蛋白:蛋白相互作用
1. 哺乳动物双杂交系统
双杂交系统是用于体内蛋白与蛋白相互作用检测的极为有力的工具。
CheckMate™ Mammalian Two-Hybrid System
CheckMate™/Flexi® Vector Mammalian Two-Hybrid System
2. Pull-Down系统
HaloTag® 哺乳动物 Pull-Down 系统用于捕获和纯化细胞内成对的和高等级的蛋白复合物,包括瞬时的或弱相互作用的伴侣蛋白。
HaloTag® Mammalian Pull-Down and Labeling System
HaloTag® Mammalian Pull-Down System
HaloTag® Complete Pull-Down System
更多资源
3. 应用文献
Pull-Down系统应用:
[1] Chiharu Moriya, Hiroaki Taniguchi, Satoru Nagatoishi, et al. PRDM14 Directly Interacts With Heat Shock Proteins HSP90α and Glucose-Regulated Protein 78. Cancer Sci. 2018.
哺乳动物双杂交系统应用:
[1] Gunnhildur Ásta Traustadóttir, Charlotte Harken Jensen, Jose Javier Garcia Ramirez, et al. The Non-Canonical NOTCH1 Ligand Delta-like 1 Homolog (DLK1) Self Interacts in Mammals. Int J Biol Macromol. 2017.
[2] Yong-Yeon Cho, Faqing Tang, Ke Yao, et al. Cyclin-dependent kinase-3-mediated c-Jun Phosphorylation at Ser63 and Ser73 Enhances Cell Transformation. Cancer Res. 2009.
HaloCHIP™ 系统应用:
[1] Toryn M Poolman, Stuart N Farrow, Laura Matthews, et al. Pin1 promotes GR transactivation by enhancing recruitment to target genes. Nucl. Acids Res. 2013.