基于体外表达的蛋白功能分析

Promega提供丰富的无细胞蛋白表达产品供您选择,系统包括原核表达系统和真核表达系统,反应模板类型灵活选择,大约1-4小时即可快速获得目的蛋白。

引言

无细胞蛋白表达技术是指用含有蛋白合成必需的组分(核糖体,转运RNA,氨酰合成酶,启动/延伸/终止因子,三磷酸鸟苷,ATP,Mg2+,K+)的细胞裂解物在体外进行蛋白合成。与传统的基于细菌或真核细胞的蛋白表达相比,无细胞蛋白表达系统有着独特的优势,节省时间,提高功能性/可溶性全长蛋白的产量,且仅需几小时就可以在体外表达出目的蛋白。

蛋白表达系统

Promega的无细胞蛋白表达系统分为:

真核无细胞蛋白表达系统:
  • 兔网织红细胞蛋白表达系统
  • 麦胚蛋白表达系统
  • 昆虫细胞提取物系统
原核无细胞蛋白表达系统:
  • 大肠杆菌提取物系统



真核无细胞蛋白表达系统

1. 兔网织红细胞蛋白表达系统
特别推荐产品——引用文献最为广泛的无细胞蛋白表达系统  

TNT® SP6 Quick Coupled Transcription/Translation System

L2080L2081


TNT® T7 Quick Coupled Transcription/Translation System

L1170L1171


TNT® T7 Quick for PCR DNA                                      

L5540


2.麦胚蛋白表达系统
Promega产量最高的真核无细胞蛋白表达系统

TNT® SP6 High-Yield Wheat Germ Protein Expression System                   

L3260L3261


3.昆虫细胞提取物蛋白表达系统
Promega活性最高的真核无细胞蛋白表达系统

TNT® T7 Insect Cell Extract Protein Expression System                   

L1101L1102


原核无细胞蛋白表达系统

大肠杆菌提取物蛋白表达系统——Promega产量最高的无细胞蛋白表达系统

E. coli S30 T7 High-Yield Protein Expression System

L1110L1115

 
无细胞蛋白表达系统选择
蛋白纯化和检测

Promega提供多种蛋白纯化系统,可根据实验需求进行选择。


蛋白相互作用

机体细胞内每个蛋白质并不是独立发挥作用,通常与其它蛋白质或DNA相互作用,在特定的时间和空间内行使特定的功能,构成各项生命活动的基础。

一、蛋白:蛋白相互作用

1. 哺乳动物双杂交系统

双杂交系统是用于体内蛋白与蛋白相互作用检测的极为有力的工具


CheckMate™ Mammalian Two-Hybrid System

E2440


CheckMate™/Flexi® Vector Mammalian Two-Hybrid System

C9360


2. Pull-Down系统

HaloTag® 哺乳动物 Pull-Down 系统用于捕获和纯化细胞内成对的和高等级的蛋白复合物,包括瞬时的或弱相互作用的伴侣蛋白。 


HaloTag® Mammalian Pull-Down and Labeling System

G6500


HaloTag® Mammalian Pull-Down System

G6504


HaloTag® Complete Pull-Down System

G6509


二、蛋白:DNA相互作用

1. HaloCHIP™ 系统

HaloCHIP™ 系统是一种为共价捕获细胞内蛋白 : DNA 复合物而设计的一种新方法,不需要抗体,是普通的染色质免疫共沉淀 ( ChIP ) 之外的又一种高效的,有力的替代方案。 


HaloCHIP™ System

G9410


查看全部蛋白相互作用产品


更多资源

1. 无细胞蛋白表达载体图谱,载体序列以及使用说明书。

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2. 如何选择符合实验目标的无细胞蛋白表达系统?

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3. 应用文献

Pull-Down系统应用:
[1] Chiharu MoriyaHiroaki TaniguchiSatoru Nagatoishi, et al. PRDM14 Directly Interacts With Heat Shock Proteins HSP90α and Glucose-Regulated Protein 78. Cancer Sci. 2018.

哺乳动物双杂交系统应用:
[1] Gunnhildur Ásta TraustadóttirCharlotte Harken Jensen, Jose Javier Garcia Ramirez, et al. The Non-Canonical NOTCH1 Ligand Delta-like 1 Homolog (DLK1) Self Interacts in Mammals. Int J Biol Macromol. 2017.
[2] Yong-Yeon ChoFaqing TangKe Yao, et al. Cyclin-dependent kinase-3-mediated c-Jun Phosphorylation at Ser63 and Ser73 Enhances Cell Transformation. Cancer Res. 2009.

HaloCHIP™ 系统应用:
[1] Toryn M PoolmanStuart N FarrowLaura Matthews, et al. Pin1 promotes GR transactivation by enhancing recruitment to target genes. Nucl. Acids Res. 2013.