蛋白相互作用分析
Protein Interaction Analysis
表征二元和高阶蛋白复合物
蛋白质间相互作用在细胞复制、转录、翻译和信号转导等过程中发挥着关键作用。HaloTag®Mammalian Pull-Down System用于捕获和纯化细胞内二元和高阶蛋白复合物,包括瞬时的或弱相互作用的伴侣蛋白。HaloTag®融合诱饵蛋白的共价结合代表其可捕捉所形成的细胞蛋白复合物,并识别更多生理相关的伴侣蛋白,而不受非特异性结合的干扰。
1. HaloTag®Mammalian Pull-Down System概述

2. 捕获相互作用的蛋白用于研究
使用具有特异性的p65-HaloTag®Pull-Down确定了NFκB通路中预期存在的细胞质二元和三元蛋白质间相互作用。采用质谱分析法鉴定的蛋白包括RelA(p65)、RelB、C-Rel、IκBa、IκBb、IκBe、p100、p105(p50)和p52。 | ![]() |
研究活细胞中蛋白:蛋白相互作用
研究蛋白质间相互作用的动态变化颇具挑战性。使用NanoBRET™PPI Assay可在细胞条件下对诱导和抑制的蛋白间相互作用进行实时研究。基于生物发光共振能量转移(BRET)技术,即生物发光供体蛋白接近荧光标记的受体蛋白,NanoBRET™Assay将明亮的NanoLuc®萤光素酶用作能量供体,并将荧光基团标记的HaloTag®蛋白用作能量受体。这种灵敏的PPI检测意味着可对表达水平较低的全长蛋白进行研究。 右图:当蛋白A和蛋白B发生相互作用时,从NanoLuc®-融合蛋白A(能量供体)到荧光标记的HaloTag®-融合蛋白B(能量受体)的能量转移的示意图。 | ![]() |




