RAS通路

RAS Pathway

选择合适的检测方法对RAS信号通路药物开发研究非常重要。Promega可为您提供多种检测试剂盒和先进技术来助力RAS药物的研发。这些检测试剂盒可检测化合物与通路组分的结合,并评估它们对蛋白质相互作用、蛋白质水平以及最终ERK激活的影响。

GTP酶
GTPase

GTPase-Glo™ Assay可分析GTPase的内在活性、GAP激活的GTPase活性、GAPGEF。该方法测定了GTPase反应后剩余的GTP,检测试剂将GTP转化为ATP,然后对生成的ATP进行生物发光检测。



     


GTPase-Glo™Assay的作用原理




上图. RasGTPase活性和NF1-333 GAP)介导的RasGTPase活性。2μM野生型或突变型Ras1μM NF1-3335μMGTP在含有1mM DTTGTPase/GAP缓冲液中组装反应体系,最终反应体积为10μL。将该反应溶液在室温下孵育90分钟。之后加入10μL GTPase-Glo™ Reagent 并在室温下孵育30分钟。添加检测试剂(20µL),将培养板在室温下孵育5-10分钟,并使用 GloMax® Discover System记录发光信号。



 

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